藥物代謝物的物理化學(xué)性質(zhì)差異很大,在適當(dāng)調(diào)節(jié)pH后,使用不混溶的溶劑,通過零頂空萃取的方法,可以實(shí)現(xiàn)材料的選擇性分離。溶劑的選擇是關(guān)鍵的,可以通過使用不同極性的溶劑的連續(xù)萃取來分餾分析物,可以調(diào)節(jié)樣品pH。
可以通過在適當(dāng)?shù)膒H調(diào)節(jié)下萃取來進(jìn)一步凈化樣品,提取藥物通過考慮材料的物理化學(xué)性質(zhì),仔細(xì)選擇溶劑和調(diào)節(jié)水性介質(zhì)的pH,可以從生物基質(zhì)中選擇性地分離其代謝物。理想情況下,溶劑應(yīng)在單次提取中提取藥物及其代謝物,同時(shí)將共提取的內(nèi)源性化合物的量保持在低水平。
用于提取的溶劑應(yīng)該是高純度等級(jí)的,該蒸餾將確保溶劑不含溶質(zhì),樣品濃度可能以高于分析物濃度,可能干擾隨后的分析,在代謝產(chǎn)物中,通常含有分析物反應(yīng)的醛類雜質(zhì),在分離過程中產(chǎn)生一系列衍生物。
在堿性化合物存在下,應(yīng)謹(jǐn)慎使用氯化溶劑,在藥物的提取物濃縮過程中,進(jìn)行烷基化,痕量的過氧化物在中迅速形成,可以將這些反應(yīng)的產(chǎn)物錯(cuò)誤地鑒定為代謝物,由于不耐熱化合物的降解和揮發(fā)性化合物的損失,在提取物濃縮過程中也可能出現(xiàn)其他問題,減壓蒸發(fā)和或冷凍干燥是有用的替代方法。
通常不能使用溶劑有效地提取高極性代謝物,在這種情況下,處于離子化狀態(tài)的代謝物可以與相反電荷的抗衡離子配對(duì),通過這種方法已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了幾種生物胺及其一些代謝物的分離。例如使用二磷酸作為抗衡離子從生物樣品中提取兒茶酚胺及其衍生物。
通過吸附方法分離藥物及其代謝物為傳統(tǒng)溶劑提取提供了另一種方法,零頂空萃取采用多種材料,包通過用適當(dāng)?shù)娜軇┫疵搶⒛繕?biāo)材料與基質(zhì)組分分離,該技術(shù)的成功取決于分析物對(duì)吸附劑的親和力和強(qiáng)度。在分析物分離的選擇性的多功能性,許多方面優(yōu)于溶劑萃取,具有高度可重復(fù)性,高效且易于自動(dòng)化,產(chǎn)生的廢溶劑更少。將樣品在含酚溶液中均化,提取后不需要過濾,可以在無人操作的情況下進(jìn)行,提取時(shí)間長,溶劑用量大,樣品提取后需要蒸發(fā)。
文章來源:上海靳瀾儀器制造有限公司