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①菌株的制備：菌株即擴(kuò)大培養(yǎng)后加入發(fā)酵罐的復(fù)合菌種，生產(chǎn)上需經(jīng)三次擴(kuò)大后才可加入，分別稱(chēng)一級(jí)培養(yǎng)（試管或三角瓶培養(yǎng)）、二級(jí)培養(yǎng)、三級(jí)培養(yǎng)，zui后用菌種罐培養(yǎng)。方法如下：

一級(jí)培養(yǎng)：于生產(chǎn)*天左右，選成熟無(wú)變質(zhì)的水果，壓榨取汁。裝入潔凈、干熱滅菌過(guò)的試管或三角瓶?jī)?nèi)。試管內(nèi)裝量為1/4，三角瓶則1/2。裝后在常壓下沸水殺菌1小時(shí)或58kPa下30分鐘。冷卻后接入培養(yǎng)菌種，搖動(dòng)果汁使之分散。進(jìn)行培養(yǎng)，發(fā)酵旺盛時(shí)即可供下級(jí)培養(yǎng)。

二級(jí)培養(yǎng)：在潔凈、干熱滅菌的三角瓶?jī)?nèi)裝1/2果汁，接入上述培養(yǎng)液，進(jìn)行培養(yǎng)。

三級(jí)培養(yǎng)：選潔凈、消毒的10L左右大玻璃瓶，裝入發(fā)酵栓后加果汁至容積的70%左右。加熱殺菌或用亞硫酸殺菌，后者每升果汁應(yīng)含SO2 150mg，但需放置一天。瓶口用70%酒精進(jìn)行消毒，接入二級(jí)菌種，用量為2%，在保溫箱內(nèi)培養(yǎng)，繁殖旺盛后，共擴(kuò)大用。

②發(fā)酵設(shè)備：發(fā)酵設(shè)備要求應(yīng)能控溫，易于洗滌、排污，通風(fēng)換氣良好等。使用前應(yīng)進(jìn)行清洗，用SO2或甲醛熏蒸消毒處理。發(fā)酵容器也可制成發(fā)酵貯存兩用，要求不滲漏，能密閉，不與料液起化學(xué)作用。有發(fā)酵桶、發(fā)酵罐，如恒溫發(fā)酵罐、自動(dòng)連續(xù)循環(huán)發(fā)酵罐等。

果汁發(fā)酵：發(fā)酵分主（前）發(fā)酵和后發(fā)酵，主發(fā)酵時(shí)，將果汁到入容器內(nèi)，裝入量為容器容積的4/5，攪拌均勻。

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